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品牌:原鑫生物
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兔心肌肌鈣蛋白(cTn)elisa試劑盒目的探討亞低溫預(yù)處理肝缺血再灌注損傷(HIRI)大鼠模型的保護(hù)作用機(jī)理。方法將40只SD大鼠分為4組:假手術(shù)(Sham)組、HIRI組、亞低溫處理(MH)組和MH+LY294002處理(MH+LY)組,每組10只,分別于肝缺血再灌注3、6、12、24 h后收集大鼠的血清及肝組織標(biāo)本。采用Western Blot檢測大鼠肝組織中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt,Ser308)蛋白的表達(dá)水平。采用TUNEL法和Western Blot檢測分析肝組織中細(xì)胞凋亡和凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。采用ELISA試劑盒檢測肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。采用全自動生化分析儀檢測大鼠血清ALT、AST活性。計(jì)量資料多組間比較采用單因素方差分析,進(jìn)一步兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。結(jié)果 HIRI組p-PI3K、p-Akt的相對表達(dá)水平明顯低于Sham組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q值分別為5. 217、5. 456,P值均0. 01);經(jīng)亞低溫處理后大鼠肝組織中p-PI3K、p-Akt的相對表達(dá)水平明顯高于HIRI組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q值分別為10. 434、14. 116,P值均0. 01)。


兔心肌肌鈣蛋白(cTn)elisa試劑盒本發(fā)明涉及一種人活性顆粒酶K重組蛋白(rhGzmK)的制備方法,該重組蛋白去除了人顆粒酶K(hGzmK)N端的24個(gè)氨基酸,并在C端增加了6個(gè)組氨酸,以方便用鎳離子柱進(jìn)行純化。其流程是:抽提人NK92細(xì)胞的總RNA,利用RT-PCR技術(shù)得到hGzmK基因,將之與原核表達(dá)載體pET24a(+)相連,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pET24a(+)-hGzmK,經(jīng)轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21后獲得工程菌,該工程菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)可表達(dá)rhGzmK。該重組蛋白以包涵體的形式表達(dá),可利用鎳親和層析柱進(jìn)行純化,其純度可達(dá)95%以上。該方法具有操作簡單、產(chǎn)量高、重組蛋白易于純化等特點(diǎn),且純化蛋白具有較高的生物學(xué)活性。


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